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野菊花总黄酮对酒精性脂肪肝大鼠的防治作用

时间:2016-08-30

【摘要】摘要目的探讨野菊花总黄酮(TFC)对大鼠酒精性脂肪性肝的防治作用及部分机制。方法以酒精联合脂肪乳剂灌胃,每天2次,连续6周,制备大鼠酒精

 

摘要目的探讨野菊花总黄酮(TFC)对大鼠酒精性脂肪性肝的防治作用及部分机制。方法以酒精联合脂肪乳剂灌胃,每天2次,连续6周,制备大鼠酒精性脂肪性肝模型。

    TFC(84,168、336ms/kg)组和凯西莱组同时灌服相应药物。

    于实验第6周末采血,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ATJT)、天门冬氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、乙醇脱氢酶(ADH)、肿瘤坏死因子一(TNF一)及肝组织超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA),并做肝脏病理学检查。

    结果TFC(168、336m/skg)组能明显降低酒精性脂肪性肝大鼠血清AST、ALT、TC、TG、ADH、TNF一0【水平,降低肝脏中MDA含 量,增强SOD活性;同时病理组织学显示TFC能明显改善酒精性脂肪性肝炎大鼠的肝细胞脂肪变性。结论TFC对大鼠酒精性脂肪性肝炎具有较好的防治作用。 其作用机制可能与调节脂质代谢,减轻脂质过氧化损伤、提高血液中ADH含量,抑制TNF-d过表达有关。
    关键词:脂肪肝;酒精性;脂质过氧化;野菊花总黄酮

    近年来,随着人们生活方式和饮食结构的改变,酒精性脂肪肝的发病率急剧上升,尚缺乏有效的防治药物。野菊花总黄酮 (totallfavonoidsofChrysan—themumindicum,TFC)是从传统中药野菊花中分离提取得到的具有抗炎、镇痛和免疫调 节作用的有效成分…,本课题组前期研究表明其对四氯化碳引起的肝损伤有一定的保护作用。本实验就其对酒精性脂肪肝防治作用进行观察并探讨其作用机制。

    1材料与方法

1.1材料1.1.1主要药物与试剂TFC由安徽医科大学药学院研制,纯度>70%.;凯西莱购自河北宜兴药业股份有限公司(批 号:081110),上述药物临用前均用0.5%的羧甲基纤维素钠溶液制成相应浓度的混悬液;无水乙醇为国产分析纯试剂;胆固醇购白天津博迪化工股份有限 公司;脱氧胆酸钠购自上海缘聚生物科技有限公司;丙二醇、吐温一80(AR级),玉米油、白砂糖、全脂奶粉、动物用复合维生素(市售);丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒购自南京建成生物工程研 究所;总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)测定试剂盒购自北京北化康泰临床试剂有限公司;ELISA试剂盒购自R&DSystems公司。

    1.1.2实验动物普通级SD大鼠90只,6,体重(220±10)g,由安徽医科大学实验动物中心提供。

    1.2方法

1.2.1动物模型的制备与给药方法参照Liber.Decarlietal3液体食物模型,以酒精联合脂肪乳剂2.5 TFC对各实验组大鼠血清ADH水平的影响模型组血清ADH含量高于正常组(P<0.05)。与模型组比较,凯西莱,TFC(168、 336mg/kg)组能明显提高血清ADH含量(P

    酒精性脂肪性肝的高甘油三酯血症来源于乙醇及其氧化产物与肝内脂质代谢的相互作用。临床检验发现酒精性脂肪肝线粒体损伤可以增加体内脂肪酸积聚,促进TG 形成,使TG在体内合成增多,促进肝脂肪化的形成。本实验结果表明,模型组大鼠血清中TG、TC含量显著增高,TFC可显著降低大鼠血清TG、TC的含 量。提示TFC防治大鼠酒精性脂肪性肝的机制可能与其调节脂质代谢作用有关。

    酒精的氧化过程会产生大量的自由基(如OH一、H O)攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用。该作用产生的脂质过氧化物MDA可以与蛋白质、核酸(DNA、RNA)等大分子化合物交联,导致 细胞和胞内细胞器代谢及功能障碍,甚至死亡。作为体内重要的抗氧化酶,SOD能清除自由基,减少脂质过氧化反应,对机体的氧化和抗氧化平衡起着重要作用, 是体内重要的保护细胞因子。本实验结果显示,TFC能显著降低大鼠肝组织MDA含量,增强SOD活性。提示TFC防治大鼠酒精性脂肪肝的机制可能与其减轻 脂质过氧化损伤有关。

    ADH是酒精在体内代谢的关键酶,根据血液ADH酶含量可以判断乙醇在体内的代谢速度]。如果乙醇代谢速度慢,中间代谢产物乙醛在体内积聚时间长,导致 MDA积累,进一步加重肝损伤。本实验中TFC组血清中ADH含量比模型组明显增高,表明TFC可以提高酒精性脂肪肝病程中血清ADH含量,加快体内的乙 醇代谢速度,减少其生物利用度,降低乙醇对肝脏的损伤,提示TFC防治大鼠酒精性脂肪肝的作用机制可能与提高血液中ADH含量有关。

    TNF一仅主要由肝实质细胞和肝内Kupffer细胞分泌,可以诱导肝细胞凋亡,也可以导致肝细胞坏死,是造成肝细胞损伤的主要因子。研究表明,乙醇可以 促使早期生长反应蛋白.1与TNF.o【结合,也会引起TNF—OL水平升高。本实验测定血清TNF一仅含量,结果显示模型组显著增多,TFC组血清中 TNF-水平比模型组明显减少,表明TFC可以减少酒精性脂肪肝病病程中的TNF一仅含量,发挥抗炎作用。

    参考文献

[1]郁建生,郁建平.大孔吸附树脂分离纯化野菊花总黄酮[J].中国中药杂志,2007,32(20):2123.[2]张玲,李俊.野菊花总黄 酮对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用[J].安徽医科大学学报,2007,42(4):412—4. [3]DeCarliLM,LieberCS.Fattyliverintheratafterprolongedin.takeofethanolwithanutritionallyadequatenewliquiddiet[J].JNutr,1967,91(3):331 —6.[4]王建青,李俊,邹宇宏,等.非酒精性脂肪性肝炎模型的建立[J].安徽医科大学学报,2006,41(1):61—2.[5]中华医学会肝脏 病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组.酒精性肝病诊断标准[J].中华肝脏杂志,2003,11(2):72.[6]王焱,李俊,王保伟.橙皮苷对非酒精性脂 肪肝大鼠的保护作用及其机制的初探[J].安徽医科大学学报,2010,45(5):646—9. [7]BaraonaE,LieberCS.Alcoholandlipids[J].RecentDevAlco.hol,1998,14:97— 134. [8]ParadisV,KollingerM,FabreM,eta1.Insitudetectionoflipidpeorxidationby- productsinchronicliverdisease[J].Hepatology,1997,26(1):135—42.[9]李萍,钟赣生. 葛花对酒后血中乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶活性的影响[J].科技导报,2009,27(23):82—6. [10]CrewsFT,BencharaR,BrownLA.Cytokinesandalcohol[J].Al— coholClinExpRes,2006,30(4):720—3O. [11]YouM,CrabbDW.RecentadvancesinlacoholicliverdiseasII.Minireview:molecularmechanismsoflacoholicfattyliver 『J].AmJPhysiolGastrointestLiverPhysiol,2004,287(1):G1—6.

 

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